| 一般情况 | |
|---|---|
| 品种：混种犬 |
| 年龄：2岁 | |
| 性别：雌 | |
| 是否绝育：否 | |
| 诊断：利什曼病 | |
01 主诉及病史
最初是一只流浪狗，后来被人收养。接受了卵巢切除手术。在随后的两个月中，逐渐出现体重减轻、甲状腺肿大和鼻腔角化过度等症状。
02 检查及预后
体重10.6千克。使用试剂盒进行了利什曼病血清学检测，结果为阴性。
然而在进行进一步检测之前，该犬在一次散步时出现了严重的呼吸困难并突然死亡。
03 尸检
宏观评估发现该犬四肢均有多灶性脱毛，鼻腔上皮和四肢脚垫均出现过度角化。颌下、肩胛前和腘窝淋巴结肿大。
打开胸腔后，观察到大量淡黄色液体（下图A），导致肺部严重受压和肺不张。胸骨淋巴结肿大、出血、易碎（下图B）。腹腔内有少量淡红色液体，肝脏中度肿大，边缘呈圆形。
↑ (A)胸腔内充满大量淡黄色液体。(B)胸部外淋巴结出现坏死和出血，胸腔内有大量淡黄色液体。
胸腔积液的细胞学分析显示存在大量淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞。大量巨噬细胞胞浆内含有利什曼原虫。在细胞外也能观察到这些结构（下图C）。鉴于胸腔积液颜色浑浊、细胞密集，因此被归类为渗出液。胸腔、下颌骨和腘窝淋巴结以及脾脏、骨髓和耳尖血涂片（下图D）的细胞学分析也显示，巨噬细胞的细胞质中存在大量利什曼原虫。
↑ (C)胸腔积液涂片细胞学检查发现巨噬细胞胞浆内含有利什曼原虫。(D)血涂片细胞学检查显示巨噬细胞胞浆内有利什曼原虫。
显微镜下观察到肺部出现气胸（下图）。
↑ 肺不张以肺泡塌陷为特征，肺泡间隙明显受压。
淋巴结结构也发生了变化，由淋巴细胞和组织细胞组成的细胞浸润明显，巨噬细胞伴有胞浆内的利什曼原虫和中性粒细胞（下图），还有出血和坏死区域。骨髓显示由泡沫巨噬细胞、浆细胞和利什曼原虫组成的炎性浸润。在巨噬细胞的细胞质中发现了利什曼原虫。皮肤显微镜评估显示，淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞明显弥漫性炎症浸润，胞浆内结构与利什曼原虫相符。
↑ (A)淋巴结显示巨噬细胞胞浆内有利什曼原虫（箭头）。(B)骨髓显示巨噬细胞胞浆内有利什曼原虫（箭头）。
肝窦中充满了许多红细胞（充血），并有许多巨噬细胞，其胞质中含有非原体形式的利什曼原虫。在肾间质，有多个不连续的淋巴浆细胞炎症浸润灶。一些肾小球增厚，系膜细胞增生。此外，其他肾小球也出现硬化（早期膜增生性肾小球肾炎）。其他器官，包括心脏和神经系统均未发现病变。
为了确诊这只狗的病变与利什曼病有关，使用多克隆抗利什曼病抗体对淋巴结进行了免疫组化。结果发现，主要在巨噬细胞的细胞质中，利什曼原虫呈强阳性染色（下图）。
↑ (C)气管支气管淋巴结免疫组化。(D)胸骨淋巴结免疫组化，免疫染色明显呈阳性。
04 讨论
胸腔积液是胸膜腔内液体（渗出液、漏出液、乳糜液、淋巴液或血液）过度积聚的一种情况。当毛细血管静水压或通透性升高、血管内渗透压降低或淋巴引流受阻时，就会出现胸腔积液[1,2]。因此，胸腔积液本身并不是一种疾病，而是潜在疾病的征兆[1]。
狗的胸腔积液可能是由于外伤、先天性疾病、原发性胸部肿瘤和继发性胸部转移、腹部肿瘤以及炎症、心脏或感染性疾病引起的[3,4]。胸腔积液的细胞学评估可提示疾病的发病机制[5]。
利什曼病是一种慢性传染病，主要由幼年利什曼原虫引起，以多种症状为特征，包括咳嗽和流鼻涕等呼吸道问题[6]。利什曼病的肺部受累被认为是罕见的[7]。这些呼吸道症状通常源于全身感染扩散至肺部，导致继发性呼吸道并发症[6]。
作为利什曼病并发症的胸腔积液在人类中很少见[7]。在利什曼病犬中，仅有两例急性心包积液的报道[8,9]。在这些病例中，细胞学检查显示寄生虫存在于一些巨噬细胞的细胞质中。
本研究中描述的这只犬是兽医文献中报道的首例犬利什曼病伴有急性胸腔积液和猝死的病例。该动物的死因是胸腔内大量胸腔积液导致呼吸衰竭，积液压迫肺部，造成肺不张，阻碍气体交换。在某些情况下，积液严重时会导致填塞，从而损害内脏功能[2]。
胸骨淋巴结中发现的严重坏死性出血性淋巴结炎表明，这种病变与急性积液的发生有直接关系。局部（器官改变）或全身性疾病都可能导致积液，不同病因导致的积液所涉及的病理生理学也各不相同[12]。
狗胸腔积液的主要原因是心脏病、肿瘤、先天性疾病和胸腔感染[2,3]。但在本病例中，没有发现任何心脏病变，因此没有理由增加静水压。此外，也没有发现与低蛋白血症相关的水肿病变，因为没有发现肝脏病变。
本研究中观察到的犬肾损伤程度从轻度到中度不等。值得注意的是，在患尿毒症的狗身上没有发现通常与低蛋白血症有关的其他症状，如腹水和肺水肿[5]。然而，尽管没有对患者进行血液化验，但鉴于观察到的肾损伤（虽然严重程度不高），该犬胸腔中的液体也可能是低蛋白血症引起的渗出型液体。因此，该液体可能是渗出液和漏出液的混合物，因为沉淀物中有明显的细胞，但不能排除低蛋白血症导致的胸水[5]。
在本病例中，胸腔积液是最相关的临床异常。在细胞学检查中，胸腔积液涂片中可见带有胞浆内利什曼原虫的巨噬细胞，这表明胸腔积液可能是犬利什曼病的一种表现。该病例胸腔积液的细胞学结果与之前记录的病例相似，后者在心包积液中发现了与利什曼原虫相匹配的带有胞浆内结构的巨噬细胞[8]。
尽管血清学检测结果为阴性，但本病例的各种淋巴结、骨髓和耳尖血涂片的细胞学检查显示，巨噬细胞含有与利什曼原虫一致的胞浆内结构。虽然建议将ELISA等血清学检测作为疑似病例的首选方法，但直接看到病原体可立即做出确诊[8]。尽管ELISA试验的灵敏度很高，但也可能出现假阴性结果[14]。因此，即使检测结果为阴性，也建议对淋巴结和骨髓进行细胞学评估。
该犬接受了卵巢切除手术，两个月后表现出体重减轻、全身淋巴结肿大、甲状腺肿大、局部脱毛和粘膜苍白。这些症状在典型的犬利什曼病病例中很常见[6]。尽管其在手术时没有利什曼原虫感染的迹象，但手术可能导致免疫力下降和感染加剧。该动物可能在手术后两个月出现了免疫异常。
在人类中，也有免疫功能正常的利什曼病患者出现胸腔积液的病例。不过，这种情况更常见于免疫力低下的患者。在这些病例中，利什曼病的表现非常凶险，会导致胸腔积液。通常患者会出现发热、恶病质和肝脾肿大等症状[7]。
该犬在散步时突然死亡。虽然它表现出犬利什曼病的症状，但猝死并不是这种疾病的常见预兆。犬利什曼病的典型临床表现包括皮肤病变、局部或全身淋巴结肿大、消瘦、食欲不振、嗜睡、脾肿大、多尿和多饮、眼部病变、鼻衄、跛行、呕吐和腹泻。虽然也可能出现运动不耐受[6]，但很少有猝死的报道[8]。
文献中也有关于患有胸腔积液的犬运动不耐受的描述，因为它们也会出现呼吸急促、呼吸困难和发绀等症状[15]。在本病例中，对心脏和神经系统进行的宏观和组织病理学评估未发现任何病变，尽管在感染利什曼原虫的犬中也有神经系统、心肺系统和其他非典型表现的描述[16]。
本研究表明犬利什曼病与犬的急性胸腔积液和猝死有关。这项研究表明了细胞学作为常规临床实践的重要性。本研究还表明， 对胸腔积液进行死后宏观、组织病理学、免疫组化和细胞学检查对于本病例的确诊至关重要。
文献来源：Brito MCP, Sousa MF, Sampaio RAG, Linhares MT, Riquelme LF, Lacerda WK, Lucena RB. Canine Leishmaniosis Associated with Acute Pleural Effusion and Sudden Death in a Dog. Vet Sci. 2024 Jun 4;11(6):254.
参考文献
1.Jany B., Welte T. Pleural effusion in adults—Etiology, diagnosis, and treatment. Dtsch. Arztebl. Int. 2019;116:377–386.
2.Oliveira A., Engelmann A.M., Jaguezeski A.M., Silva C.B., Barbosa N.V., Andrade C.M. Retrospective study of the aetiopathological diagnosis of pleural or peritoneal effusion exams of dogs and cats. Comp. Clin. Pathol. 2021;30:811–820.
3.Mellanby R.J., Villiers E., Herrtage M.E. Canine pleural and mediastinal effusions: A retrospective study of 81 cases. J. Small Anim. Pract. 2002;43:447–451.
4.Epstein S.E. Exudative pleural diseases in small animals. Vet. Clin. N. Am. Small Anim. Pract. 2014;44:161–180.
5.López A. Respiratory system, mediastinum, and pleurae. In: Zachary J.F., McGavin M.D., editors. Pathologic Basis of Veterinary Disease. 5th ed. Elsevier; Rio de Janeiro, Brazil: 2013. p. 537. Portuguese edition.
6.Baneth G., Petersen C., Solano-Gallego L., Sykes J.E. Leishmaniosis. In: Sykes J.E.L., editor. Greene’s Infectious Diseases of the Dog and Cat. 5th ed. Elsevier; St. Louis, MO, USA: 2023. p. 3881.
7.Dasgupta S., Saha M., Chakrabarti S., Chakraborty J. Visceral leishmaniasis with pleural effusion in an immunocompetent patient. Lung India. 2014;31:56–58.
8.Sebastián-Marcos P., Santarelli G., Gómez S., Férnandez del Palacio M.J. Canine leishmaniasis associated with pericardial effusion in a 4-year-old dog. J. Vet. Cardiol. 2019;23:32–37.
9.Font A., Durall N., Domingo M., Closa J.M., Mascort J., Ferrer L. Cardiac tamponade in a dog with visceral leishmaniasis. J. Am. Anim. Hosp. Assoc. 1993;29:95e100.
10.Laurenti M.D., de Santana Leandro M.V., Jr., Tomokane T.Y., De Lucca H.R.L., Aschar M., Souza C.S.F., Silva R.M., Marcondes M., Da Matta V.L.R. Comparative evaluation of the DPP® CVL rapid test for canine serodiagnosis in area of visceral leishmaniasis. Vet. Parasitol. 2014;205:444–450.
11.Kalinin V., Padnya P., Stoikov I. Romanowsky staining: History, recent advances and future prospects from a chemistry perspective. Biotech. Histochem. 2024;99:1–20.
12.Briola C., Zoia A., Rocchi P., Caldin M., Bertolini G. Computed tomography attenuation value for the characterization of pleural effusions in dogs: A cross-sectional study in 58 dogs. Res. Vet. Sci. 2019;124:357–365.
13.Maia C., Campino L. Methods for diagnosis of canine leishmaniasis and immune response to infection. Vet. Parasitol. 2008;158:274–287.
14.Maurelli M.P., Bosco A., Foglia Manzillo V., Vitale F., Giaquinto D., Ciuca L., Molinaro G., Cringoli G., Oliva G., Rinaldi L., et al. Clinical, Molecular and Serological Diagnosis of Canine Leishmaniosis: An Integrated Approach. Vet. Sci. 2020;7:43.
15.Murphy K., Papasouliotis K. Pleural effusions in dogs and cats: 1. Diagnostic investigation. Practice. 2011;33:462–469.
16. Blavier A., Keroack S., Denerolle P., Goy-Thollot I., Chabanne L., Cadoré J.L., Bourdoiseau G. Atypical Forms of Canine Leishmaniosis. Vet. J. 2001;162:108–120.