| 一般情况 | |
|---|---|
| 品种：拳师混种犬 |
| 年龄：6岁 | |
| 性别：雄 | |
| 是否绝育：是 | |
| 诊断：蛙粪霉病 | |
01 主诉及病史
因1个月的排便困难和间歇性便血就诊。
患者没有美国亚利桑那州以外的旅行史。腹部X线显示明显便秘，没有其他异常。当地医生使用了胃复安（0.2 mg/kg PO q8h）、乳果糖（0.2-0.4 mL/kg PO q8h）、法莫替丁（0.9 mg/kg PO q12h）和硫糖铝（32 mg/kg PO q6h）。继续使用益生菌（Proviable Forte）和南瓜罐头。
02 检查
体况评分9/9，轻度牙科疾病和窦性心律失常。直肠指诊时，在直肠腹侧黏膜上触诊到一个直径1.5 cm、模糊不清的软结节，距离肛门约5.0 cm。
全血细胞计数和血生化显示轻度淋巴细胞减少（564/uL [690-4500]）、中度嗜酸性粒细胞增多（4512/uL [0-1200]）、嗜碱性粒细胞增多（282/uL [0-150]）以及以轻度高球蛋白血症（4.0 g/dL [1.6-3.6]）为特征的高蛋白血症（7.8 g/dL [5-7.4]）。
腹部超声显示腹侧结肠壁弥漫性轻度增厚（0.26 cm），保留分层。腹侧结肠壁可见一个局灶性结节（1.24 cm）。由于结肠腔内存在气体，无法评估结肠背侧壁。髂内淋巴结轻度肿大（左2.21×1.28 cm，右1.89×1.31 cm）。
在回结肠镜检查中，除了横结肠黏膜内的少数糜烂外，大多数黏膜都不明显。结肠镜检查未发现触诊到的直肠结节。回盲部瓣膜黏膜有局灶性出血。对该病变进行了活检，并对结肠和回肠进行了一般性粘膜挤压活检。
对回结肠括约肌活检进行了接触式细胞学检查，结果显示中度混合炎症，伴有细菌、慢性出血，结构与退化的肠上皮细胞最为一致。回盲部瓣膜的组织病理学检查显示，中度急性浅表粘膜出血，混有革兰氏阳性杆菌。回肠和结肠黏膜的部分厚度样本显示中度、慢性、多灶性、嗜酸性、淋巴浆细胞性回肠炎，伴有轻度结肠隐窝增生。除了回盲瓣样本中发现的杆菌外，组织病理学上没有发现病因。
结肠和盲肠交界处的PAS染色不明显。没有组织细胞性溃疡性结肠炎、化脓性肉芽肿性炎症或肿瘤的证据。
患者接受了单剂量吡喹酮/双羟萘酸噻嘧啶/非班太尔（136 mg）治疗。开始补充车前籽壳，并继续进行益生菌治疗。停用乳果糖和胃复安。启动了严格的低过敏性饮食试验（Royal Canin水解蛋白）。
在开始饮食试验约1个月后，效果不佳，持续出现排便困难和软便。开始服用恩诺沙星（12.1 mg/kg PO q24h），并继续低过敏性饮食。
1个月后，仍没有改善。当主人试图喂食商业犬粮时，患者的排便困难和便血情况恶化。重新实施了低过敏性饮食，并开始服用泼尼松（0.75 mg/kg PO q24h）。
开始泼尼松治疗6天后，临床症状急性恶化，出现严重的肛周增厚。
开始泼尼松治疗11天后，肛门直肠和肛周组织出现严重的肿胀、红斑和破溃，延伸至直肠约2.5 cm，伴有血性渗出物。重新开始服用乳果糖（0.4 mL/kg q8-12h）。
受影响部位的细针抽吸显示慢性化脓性肉芽肿性炎症，有大量直径为20-60 μm的圆形深嗜碱性菌丝或厚壁孢子以及直径为8-10 μm的深嗜碱性宽而缺乏菌丝的孢子。与分生孢子结构相似，偶尔含有侧乳突（下图）。
↑ （A）几个深嗜碱性菌丝或厚壁孢子。（B）具有侧乳突的嗜碱性菌丝或分生孢子。
肛门病变吸出物的样本被送往实验室进行了全真菌聚合酶链式反应（PCR）以及真菌培养。
03 治疗
在等待结果的同时，制定了一个经验性治疗计划。开始口服马罗吡坦、伊曲康唑和特比萘芬，并接受第一次两性霉素B脂质复合物静脉注射（计划进行10次）。泼尼松逐渐减少至0.26mg/kg/d，并打算停药。
04 预后
患者一夜之间病情迅速变化，主人选择了安乐死。
尸检时，肛周软组织和直肠明显增厚，呈多灶性至凝聚性、棕白色、坚硬结节，周边增厚至5.0 cm（下图）。结节延伸至邻近结肠约2.0 cm。整个远端结肠、直肠和肛门都有多发性粘膜溃疡。肛门内和周围有多条皮肤瘘管。腰椎下和腹股沟淋巴结中度或明显增大。回盲瓣中度、周边增厚，呈黄褐色或粉红色斑点。结肠严重气体膨胀，充血，多发性粘膜出血，并含有大量软便。
↑ 直肠和结肠切开。直肠和大部分结肠周边增厚。
在远端结肠和直肠的组织病理学检查中，出现了严重的、慢性活动性的、区域性广泛的化脓性肉芽肿性结肠炎和直肠炎，GMS染色阴性（下图B），PAS染色阳性（下图C）。菌丝直径为30-40 μm，薄壁，透明，缺乏韧性，球状，不规则。接合孢子直径为25-45 μm，具有厚的嗜酸性壁、泡沫状的嗜两性细胞质和中央核，中央核具有突出的嗜碱性核仁。真菌菌丝有时被高嗜酸性鞘包围（Splendore-Hoeppli现象）。真菌偶尔侵入血管壁和管腔。区域淋巴结中度增生和反应性。髓质窦和包膜下窦被组织细胞、浆细胞、红细胞、噬红细胞和含铁血黄素噬菌体轻度扩张。
↑ （B）增厚区域是以许多真菌为中心的化脓性肉芽肿炎症，这些真菌通常形成直径为25-45 μm的接合孢子，具有厚的嗜酸性细胞壁（箭头）。（C）真菌呈强PAS阳性（箭头）。
与之前的活检结果一致，存在慢性活动性嗜酸性、淋巴浆细胞性结肠炎。革兰氏染色显示管腔表面有少量革兰氏阳性球菌和杆菌，革兰氏阴性杆菌较少。小肠组织病理学显示，固有层被浆细胞、淋巴细胞和较少的嗜酸性粒细胞适度扩张，并延伸到粘膜肌层。虽然胰腺大体上不明显，但显微镜下可见轻度急性胰腺炎。
肛周软组织渗出液的真菌培养在15天时出现了真菌生长。对该真菌的DNA进行了测序，该序列与蛙粪担子团菌（B. ranarum）的同源性为97.69%。
生长的菌落呈半透明状，无毛或蜡质，没有气生菌丝。显示出与担子菌球一致的形态特征，即产生具有成对突起或侧喙的接合孢子，形成一种称为“喙状接合孢子”的结构（下图）。
↑ （A）菌落呈白色或奶油色。（B）菌丝边缘伸长菌丝的远端部分。（CD）在侧喙形成之前遇到异性菌丝（白色箭头）。（EF）在遗传物质交换后，接合孢子发��出其特有的喙。（GH）球状分生孢子（黑色箭头），带有无核粘性分生孢子。（I）分离的粘性分生孢子。（J）粘性分生孢子转化为孢子囊，释放球状孢子囊孢子。（K）萌发的接合孢子。
分离物的ITS序列与八迭球孢蛙粪霉菌（B. meristosporus）CBS 931.73T匹配，相似性为93.94%，而LSU序列与B. omannsis CBS 146281T匹配，相似性为98.40%。最后将该新物种命名为亚利桑那蛙粪霉菌（B. arizonensis）。
05 讨论
蛙粪霉病（Basidiobolomycosis）是一种罕见但起病较急的疾病，主要影响热带和亚热带气候下的动物和人。最初，蛙粪霉菌（Basidiobolus）被归类为接合菌门中的昆虫病原体。然而，随着分子数据越来越多，接合菌门被发现是一个多系群[1-4]。目前的分类学将蛙粪霉菌归入蛙粪霉菌亚科、蛙粪霉菌门、蛙粪霉菌目和蛙粪霉菌科[3]。
目前，该属有8个系统发育证实的物种：接合孢蛙粪霉菌（B. haptosporus）、大孢蛙粪霉菌（B. magnus）、八迭球孢蛙粪霉菌（B. meristosporus）、小孢蛙粪霉菌（B. microsporus）、B. minor、蛙粪担子团菌（B. ranarum）、B. omanensis [5]。
由于曾被归类为接合菌门，该霉菌的感染仍被非正式地称为“接合菌病”[6,7]。这些真菌存在于土壤、死水中，并作为共生微生物存在于一些两栖动物、鱼、爬行动物和蝙蝠的胃肠道中[8-10]。
大多数病例发生在亚洲、南美洲、东非和西非的热带和亚热带地区，最近发生在英格兰、美国西南部、沙特阿拉伯、伊朗和伊拉克[11,12]。推测真菌孢子通过昆虫叮咬、轻微创伤、吸入和摄入进入宿主[11]。
感染通常会导致皮肤、鼻、肺和胃肠道疾病[7,11,12]。在人和动物中，蛙粪霉病通常与其他更常见的疾病相似，这使得识别更加困难[6,13-18]。此外，一旦发现真菌，由于文献中报告的成功治疗病例很少，疾病通常会进展到晚期。
蛙粪霉病已在人类、狗和马中报道过[21]。在狗中，少数报告的病例最常见的是皮肤[22]、肺[22,23]和胃肠道[6,13,23,24]。据报道，犬胃肠蛙粪霉病发生在胃和小肠[23]，在结肠中扩散[24]，并局限于结直肠区域[6]。
本病例是一种局部、区域性广泛的结肠、直肠、肛门和会阴感染，感染了一种新型的真菌，即亚利桑那蛙粪霉。由于感染仅限于一个区域并涉及会阴皮肤，因此最可能考虑的途径是经皮接触感染。本病例的临床病史和受累部位与既往研究[6]最为相似，后者描述了一只7岁的阉割雄性法国斗牛犬，有1个月的腹泻、排便困难、便血和活动减少病史[6]。
该真菌的细胞学、组织病理学、培养和DNA序列分析支持该病例为人和兽医文献中首次记录的亚利桑那蛙粪霉感染病例。真菌性结肠直肠炎是该患者慢性痢疾和排便困难的潜在原因，抗炎糖皮质激素可能会加剧感染。
文献来源：Black A, Wiertek M, Ferguson S, Wycislo K, Rayhel L, Reid H, Wiederhold N, Cañete-Gibas C. Case report: Localized coloproctitis caused by novel Basidiobolus arizonensis in a dog. Front Vet Sci. 2024 Sep 9;11:1427496.
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